原因

解決方法

1、篩板阻塞

1、a、反沖色譜柱b、更換進(jìn)口篩板c、更換色譜柱

2、色譜柱塌陷

2、填充色譜柱

3、干擾峰

3、a、使用更長(zhǎng)的色譜柱b、改變流動(dòng)相或更換色譜柱

4、流動(dòng)相PH選擇錯(cuò)誤

4、調(diào)整PH值。對(duì)于堿性化合物，低PH值更有利于得到對(duì)稱(chēng)峰

5、樣品與填料表面的溶化點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)圖

5、a、加入離子對(duì)試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑b、更改色譜柱

原因

解決方法

1、柱溫低

1、升高柱溫

2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

2、使用流動(dòng)相作為樣品溶劑

3、樣品過(guò)載

3、降低樣品含量

原因

解決方法

1、保護(hù)柱或分析柱污染

1、取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析。如果必要更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，拆下來(lái)清洗。如果問(wèn)題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運(yùn)用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果?wèn)題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。

2、樣品溶劑不溶于流動(dòng)相

2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動(dòng)相作為樣品溶劑。

原因

解決方法

1、樣品過(guò)載

1、減少樣品載量

原因

解決方法

1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

1、a、減少進(jìn)樣體積b、運(yùn)用低極性樣品溶劑

原因

解決方法

1、柱外效應(yīng)

1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）b、使用小體積的流通池

原因

解決方法

1、二級(jí)保留效應(yīng)，反相模式

1、a、加入三乙胺（或堿性樣品）b、加入乙酸（或酸性樣品）c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）d、更換一支柱子

2、二級(jí)保留效應(yīng)，正相模式

2、a、加入三乙胺（或堿性樣品）b、加入乙酸（或酸性樣品）c、加入水（或多官能團(tuán)化合物）d、試用另一種方法

3、二級(jí)保留效應(yīng)，離子對(duì)

3、加入三乙胺（或堿性樣品）

原因

解決方法

1、緩沖不合適

1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液

b、使用Pka等于流動(dòng)相PH值的緩沖液

原因

解決方法

1、樣品中有其他組份

1、正常

2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰

2、a、增加運(yùn)行時(shí)間或梯度斜率b、提高流速

3、空位或鬼峰

3、a、檢查流動(dòng)相是否純凈b、使用流動(dòng)相作為樣品溶劑c、減少進(jìn)樣體積

原因

解決方法

1、溫控不當(dāng)

1、調(diào)好柱溫

2、流動(dòng)相組分變化

2、防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）

3、色譜柱沒(méi)有平衡

3、在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱

原因

解決方法

1、流速變化

1、重新設(shè)定流速

2、泵中有氣泡

2、從泵中除去氣泡

3、流動(dòng)相選擇不恰當(dāng)

3、a、更換合適的流動(dòng)相b、選擇合適的混合流動(dòng)相

1、柱溫波動(dòng)。（即使是很小的溫度變化都會(huì)引起基線(xiàn)的波動(dòng)。通常影響示差檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的紫外檢測(cè)器或其它光電類(lèi)檢測(cè)器。）

1、控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，在檢測(cè)器之前使用熱交換器圖

2、流動(dòng)相不均勻。（流動(dòng)相條件變化引起的基線(xiàn)漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。）

2、使用HPLC級(jí)的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中使用氦氣。

3、流通池被污染或有氣體

3、用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）

4、檢測(cè)器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線(xiàn)）

4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測(cè)器手冊(cè)更換流通池窗。

5、流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化

5、更改配比或流速。為避免這個(gè)問(wèn)題可定期檢查流動(dòng)相組成及流速。

6、柱平衡慢，特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)

6、用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流動(dòng)相時(shí)，在分析前用10-20倍體積的新流動(dòng)相對(duì)柱子進(jìn)行沖洗。

7、流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成

7、檢查流動(dòng)相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑

8、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線(xiàn)。

8、使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過(guò)程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。

9、使用循環(huán)溶劑，但檢測(cè)器未調(diào)整。

9、重新設(shè)定基線(xiàn)。當(dāng)檢測(cè)器動(dòng)力學(xué)范圍發(fā)生變化時(shí)，使用新的流動(dòng)相。

10、檢測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在最大吸收波長(zhǎng)處。

10、將波長(zhǎng)調(diào)整至最大吸收波長(zhǎng)處

原因

解決方法

1、在流動(dòng)相、檢測(cè)器或泵中有空氣

1、流動(dòng)相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測(cè)器或泵中的空氣。

2、漏液圖

2、見(jiàn)第三部分。檢查管路接頭是否松動(dòng)，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。

3、流動(dòng)相混合不完全

3、用手搖動(dòng)使混合均勻或使用低粘度的溶劑

4、溫度影響（柱溫過(guò)高，檢測(cè)器未加熱）

4、減少差異或加上熱交換器

5、在同一條線(xiàn)上有其他電子設(shè)備

5、斷開(kāi)LC、檢測(cè)器和記錄儀，檢查干擾是否來(lái)自于外部，加以更正。

6、泵振動(dòng)

6、在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器

原因

解決方法

1、漏液

1、檢查接頭是否松動(dòng)，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。

2、流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成

2、檢查流動(dòng)相的組成。

3、流動(dòng)相各溶劑不相溶

3、選擇互溶的流動(dòng)相

4、檢測(cè)器/記錄儀電子元件的問(wèn)題

4、斷開(kāi)檢測(cè)器和記錄儀的電源，檢查并更正。

5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡

5、用強(qiáng)極性溶液清洗系統(tǒng)

6、檢測(cè)器內(nèi)有氣泡

6、清洗檢測(cè)器，在檢測(cè)器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器

7、流通池污染（即使是極少的污染物也會(huì)產(chǎn)生噪音。）

7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池

8、檢測(cè)器燈能量不足

8、更換燈

9、色譜柱填料流失或阻塞

9、更換色譜柱

10、流動(dòng)相混合不均勻或混合器工作不正常

10、維修或更換混合器，在流動(dòng)相不走梯度時(shí)，建議不使用泵的混合裝置

原因

解決方法

1、流動(dòng)相組成變化

1、重新制備新的流動(dòng)相

2、流動(dòng)相流速太低

2、調(diào)節(jié)流速

3、漏液（特別是在柱子和檢測(cè)器之間）

3、檢查接頭是否松動(dòng)、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。

4、檢測(cè)器設(shè)定不正確

4、調(diào)整設(shè)定

5、緩沖液濃度太低

5、增加濃度

6、保護(hù)柱污染或失效

6、更換保護(hù)柱

7、色譜柱污染或失效，塔板數(shù)較低

7、更換同樣類(lèi)型的色譜柱。如果新柱子可以提供對(duì)稱(chēng)的色譜峰，則用強(qiáng)溶劑沖洗舊柱子。

8、柱入口塌陷

8、打開(kāi)柱入口，填補(bǔ)塌陷或更換柱子

9、呈現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)未被完全分離的物質(zhì)的峰

9、選擇其它類(lèi)型的色譜柱以改善分離效果

10、柱溫過(guò)低

10、提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過(guò)75℃

11、檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大

11、使用較小的時(shí)間常數(shù)

原因

解決方法

1、流動(dòng)相污染或變質(zhì)（引起保留時(shí)間變化）

1、重新配置流動(dòng)相

2、保護(hù)柱或分析柱阻塞圖

2、去掉保護(hù)柱進(jìn)行分析。如果必要?jiǎng)t更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，可進(jìn)行反沖。如果問(wèn)題仍然存在色譜柱可能被強(qiáng)保留的污染物損壞，建議使用恰當(dāng)?shù)脑偕绦颉Ｈ绻麊?wèn)題仍然存在，進(jìn)口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。

原因

解決方法

1、檢測(cè)器衰減設(shè)定過(guò)高

1、減少衰減的設(shè)定

2、檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)設(shè)定太大

2、設(shè)定較小的時(shí)間常數(shù)

3、進(jìn)樣量太少

3、增大進(jìn)樣量

4、記錄儀連接不當(dāng)

4、使用正確的連接

原因

解決方法

1、檢測(cè)器衰減設(shè)定過(guò)低

1、采取較大的衰減

2、進(jìn)樣過(guò)多

2、減少進(jìn)樣量

3、記錄儀連接不正確

3、正確連接記錄儀