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分子生物學(xué)實驗室儀器配置清單

點擊: 次 時間:2017-02-18 10:51

一、溫度控制系統(tǒng)

1、冰箱

根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。

4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。

-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。

-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。

0-10℃的冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。

2、液氮罐

有些實驗材料、某些器官組織、細(xì)胞株、菌株及純化的樣品等,要求速凍和長期保存在超低溫環(huán)境下,就需要一個液氮罐(-196℃)具有經(jīng)濟(jì)、省力和較好地保持細(xì)胞生物學(xué)特性的優(yōu)點。

3、培養(yǎng)箱

37℃恒溫培養(yǎng)箱用于細(xì)菌的固體培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。

CO2培養(yǎng)箱適用于培養(yǎng)各種細(xì)胞,可恒定地提供一定量的CO2(通常5%),用來維持培養(yǎng)液的酸度(pH值)。37℃恒溫空氣搖床可進(jìn)行液體細(xì)菌的培養(yǎng)。

4、水浴鍋

用于保溫。

25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗,各種生物化學(xué)酶反應(yīng)等試驗的保溫。

25-100℃水浴箱用于常規(guī)試驗。

5、烘箱

主用于烘干實驗器皿,有些需要溫度高些,有些需要溫度低些。用于RNA方面的實驗用具,需要在250℃烤箱中烘干,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。

二、水的凈化裝置

隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,許多實驗對水純度的要求越來越高。

1、蒸餾水皿

單蒸水常難以滿足實驗要求。雙蒸水、三蒸水配液,許多實驗要去離子水。

多次蒸餾水可除去水中揮發(fā)性雜質(zhì),不能完全除去水中溶解的氣體雜質(zhì)(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ))。

2、離子交換器

去離子水—用離子交換法制取的水,稱去離子水。

去離子效果好,但不能除去水中的非離子型雜質(zhì),其中常含有微量的有機物(樹脂等)。

3、超純水機

用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應(yīng)、組織和細(xì)胞培養(yǎng)等。

三、菌消毒設(shè)備

分子生物學(xué)所用大部分試劑,而且實驗用具都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。

1、蒸汽消毒鍋

用于小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時進(jìn)行消毒。

2、紫外線

75%乙醇、0.1%SDS(消毒劑)

一些耐高壓、高溫消毒且可用紫外線照射或乙醇和SDS浸泡。

紫外線照射使用方便,且很方便,但滅菌效果與距離有關(guān),且產(chǎn)生臭氧污染安全,用于無菌室,超凈臺和塑料用具的消毒。

3、濾器濾膜

不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。

4、煮沸消毒

主用于金屬器械和針急需時采用。

四、計量系統(tǒng)

1. 稱量系統(tǒng):

(各種天平)臺秤、托盤天平、鈕力擺動天平、光電分子天平、精密電子分析天平

2. 液體體積的度量:

精:量筒、移液管、微量取液器

粗:刻度試管、燒杯、錐形瓶

3. pH值測量:

pH

測定溶液中H+的直接電位的儀器,主要通過一對電極,在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動勢用pH值表示出來。

pH試紙:

只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴(yán)格的pH值,需精確度高(小數(shù)點后兩位)的pH計。

4. OD值測量:

光密度、分光光度計是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一,通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值,利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。

五、離心機

離心技術(shù)是研究生物的結(jié)構(gòu)和功能中不可缺少的一種物理技術(shù)手段。因為各種物質(zhì)在沉淀系數(shù)、浮力、和質(zhì)量等方面有差異,可利用強大的離心力場,使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機??晒┥儆?.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術(shù)應(yīng)用廣泛,包括收集和分離細(xì)胞、細(xì)胞器和生物大分子等。據(jù)其轉(zhuǎn)速的不同,可分為以下幾種類型:

1.普通離心機:

最大轉(zhuǎn)速6000r/m,最大離心力6000g

①醫(yī)用或臺式離心機:

是離心機中最簡單而廉價的,最常用于收集快速沉降系數(shù)的物質(zhì),如紅細(xì)胞、**的沉淀物、酵母菌和細(xì)菌等。

②低速冷凍離心機:

主要用于細(xì)胞、細(xì)胞核、細(xì)胞膜和細(xì)菌的沉淀和收集等。

2. 高速離心機:

最大轉(zhuǎn)速25000r/m,最大離心力89000g

有冷凍和常溫兩種,多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。

3. 超速離心機:

最大轉(zhuǎn)速9000r/m,最大離心力694000g。

4. 臺式超速離心機:

最大轉(zhuǎn)速12000r/m,最大離心力625000g。

六、超凈工作臺

內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備,是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機驅(qū)動空氣,經(jīng)過低、中效的過濾器后,通過工作臺面,使實驗操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。超凈臺按氣流方向的不同大致有幾種類型:

①側(cè)流式:凈化后氣流,從左側(cè)或右側(cè)通過工作臺面,流向?qū)?cè),或者從上往下或從下往上流向?qū)?cè),他們都能形成氣流屏障而保障臺面無菌。

缺點:在凈化氣流和外邊氣體交界處,可因氣體的流向而出現(xiàn)負(fù)壓,使少量的未凈化氣體混入,而造成污染。

②外流式:氣流是面向操作人員的方向流動,從而保證外面氣體不能混入。

缺點:在進(jìn)行有害物質(zhì)實驗時,對操作人員不利,但可采用有機玻璃把上半部分遮擋起來,使氣流往下方流出。

七、電泳系統(tǒng)

電泳技術(shù)是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征,甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。核酸和蛋白質(zhì)等都帶有電荷,當(dāng)它們被置于電場中時,能夠移動。

電泳裝置由兩部分組成:電源裝置和電泳槽裝置。

①電泳裝置:電源需經(jīng)穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器,既能提供穩(wěn)定的直流電,又能輸出穩(wěn)定的電壓??捎糜谌N:

常度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓0-500v0-15mA

中度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓400-1000v

高度穩(wěn)壓電泳儀:輸出電壓1000以上的電源裝置。

②電泳槽裝置:分兩種

水平式電泳槽:一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽

垂直式電泳槽:分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。

八、PCR

Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環(huán)儀,基因擴(kuò)增,它是使一對寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè),從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行的DNA變性,引物復(fù)性,DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)三個過程。

九、凝膠成像分析系統(tǒng)

對電泳后含溴乙錠(EB)核酸樣品的觀察分析。

十、干燥設(shè)備

1.真空加熱干燥箱:核酸在硝酸纖維素膜和尼龍膜上固定,用于雜交實驗。

2.電泳凝膠干燥箱:電泳后的凝膠進(jìn)行脫水干燥的儀器,一般可將凝膠干燥到一些玻璃紙上,干燥后的凝膠易于保存。

3.液氮冷凍干燥:適用于活性蛋白質(zhì)樣品的干燥與結(jié)晶。

4.真空泵:許多實驗都需要抽真空。如:乙醇沉淀后核酸樣品的干燥,電泳凝膠的干燥等。

十一、其他

1.微波爐:便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。

2.制冰機:用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實驗操作所需的低溫環(huán)境,以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。

3.層析裝置:(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。

真空印記系統(tǒng),DNA合成/測序儀:這些都是對核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。

4.磁力攪拌器:多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器:用于混合儀器。

5.組織勻漿器:超聲組織及細(xì)胞破碎器,用其進(jìn)行樣品的分離提純實驗。

6.通風(fēng)櫥:很多溶劑能逸出毒氣,必備柜,放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。

7.玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用于酚等有機溶劑的蒸餾。

8.Tip頭、Eppendorf管:

微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌,硅化消毒后反復(fù)使用。對一些要求嚴(yán)格的實驗,如RNA的提取、保存等操作,應(yīng)使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應(yīng)備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500ml、250ml、50ml、7ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培養(yǎng)塑料平板等。

9.小型設(shè)備、用具:

定時器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應(yīng)使用棕色試劑瓶,如飽和酚、巰基乙醇等)、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)



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